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Test biochimici

Enzimi della via glicogeno- e glicolitica:

• Fosfoglucomutasi
• Fosfoglucoisomerasi
• Aldolasi
• Gliceraldeide-3-P isomerasi:
• Fosfogliceratochinasi:
• Fosfogliceratomutasi:
• Enolasi
• Piruvatochinasi
• LDH
• Fosforilasi
• Fosfofruttochinasi
• Deramificante
• Maltasi acida e neutra
• Dosaggio Glicogeno

Enzimi mitocondriali:

• Catena Respiratoria
• Succinato deidrogenasi
• NADH deidrogenasi
• DPNH citocromo c reduttasi
• Succinato citocromo c ossidoreduttasi
• Citocromo c ossidasi
• Citrato sintetasi

Beta-ossidazione:

• PalmitoilCoA deidrogenasi
• OctanoilCoA deidrogenasi
• ButirrilCoA deidrogenasi
• Carnitina Palmitoil Trasferasi (reazioni isotope e forward)

Altre attività enzimatiche:

• Adenilato deaminasi
• Glucosio 6-Fosfato Deidrogenasi
• Galattosio 1 P Uridil-Transferasi
• Glutammato Deidrogenasi

Metaboliti plasmatici:

• Lattato basale
• Test di Munsat
• Carnitina totale e libera

Proteine muscolari (Western blotting):

• Distrofina (NH2, Rod domain, COOH)
• Caveolina 3
• Disferlina
• Calpaina 3
• Alfa-Sarcoglicano
• Beta-Sarcoglicano
• Gamma-.Sarcoglicano
• Delta-Sarcoglicano
• Telethonina
• Desmina
• Alfa-distroglicano

Test genetica molecolare

DNA nucleare

• Distrofie Muscolari di Duchenne e Becker:
  Gene della distrofina (Chamberlain JS et al. Nucl Acid Res 16: 11141-56, 1990; Beggs AH et al. Human Genet 86: 45-49, 1990): Analisi di delezione.
• Forma Familiare di Sclerosi Laterale Amiotrofica:
  Cu-Zn Superoxide Dismutase (SOD1) (Yulug IG et al. Hum Mol Genet 4: 1101-1104, 1995): Sequenza codificante.
• Amiotrofia Spinale, AR, Cr. 5:
  Survival Motor Neuron gene (Van der Steege G et al. Lancet 345: 985-986, 1995):
  Analisi di delezione esoni 7 e 8.
• Sindrome dell'Ipertermia Maligna:
  Gene RYR1 ( Manning BM et al Am J Hum Genet 62: 599-609, 1998.): Analisi di mutazioni puntiformi.
• Malattia di Alzheimer:
• Aplotipo locus APO E (Hixson JE J Lipid Res 1990)
• Deficit di Carnitina Palmitoil-Trasferasi
  Gene CPT 1 (Taroni F. et al. Nature Genet 4: 314-319, 1993): Sequenza codificante
• Deficit di Enzima Deramificante
• Gene AGL (Lucchiari et al. Am J Med Genet, 2002):
  Sequenza codificante.
• Deficit di Mioadenilato Deaminasi
• Gene MAD:mutazione puntiforme comune.
• Sindrome di Leigh con deficit di Citocromo c Ossidasi:
  Surf-1 (Tiranti et al. Am J Hum Gen 63: 1609-1621, 1998): Sequenza codificante
• Oftalmoplegia Estrinseca Progressiva con delezioni multiple del DNA mitocondriale, Autosomica Dominante 1:
  ANT1 (Kaukonen et al. Science 2001): Sequenza codificante
• Oftalmoplegia Estrinseca Progressiva con delezioni multiple del DNA mitocondriale, Autosomica Dominante 3:
  POLG (Van Goethem et al. 2002) Sequenza codificante.
• Morbo di Parkinson
• Parkina
• Sinnucleina alfa

DNA mitocondriale

• Southern blot
• Mutazione 3243 e sequenza tRNA LeuUUR (MELAS)
• Mutazione 8344 (MERRF)
• Mutazione 8356 (MERRF / MELAS)
• Mutazioni G13708A, G3460A, G15812A, G15257A, T3394C, G7444A, G5244A T14484C, G14459A, T14596A (Neuropatia Ottica Ereditaria di Leber):
• Mutazioni NARP / LS
• Mutazione MiMyCa
• Analisi di sequenza dell’intero genoma mitocondriale.

Colture cellulari

L'attivita' del laboratorio e' orientata in senso clinico-diagnostico e di ricerca. Il primo aspetto consiste nell'allestimento di colture cellulari primarie miogeniche e fibrogeniche da frammenti bioptici di pazienti affetti da patologie di tipo neuromuscolare e neurodegenerative (Vedi Banca Tessuti e DNA LINK). L'attività di ricerca è parte integrante dei progetti di ricerca relativi alla terapia genica delle distrofie muscolari, tramite l'impiego di colture cellulari primarie e linee miogeniche e fibrogeniche murine. Vengono inoltre allestiti cibridi transmitocondriali utili alla identificazione dei meccanismi patogenetici delle malattie mitocondriali.